徕卡显微镜冷冻剂与置换剂均使用70%甘醉(Ethyleneglycol，水溶液)。将甘醉用干冰冷却到一770C.把新鲜样品投入其中，即可达到冷冻的目的.这里，甘醉可起冷冻保护剂作用。

将甘醉温度升至一500C。在此温度下，甘醉不会冻结，并可将组织内的冰置换出来。在甘醇中的组织数小时内可变得透明，说明置换过程在进行中;为达到置换需要过夜。在这期间，不断摇动样品。偏光置换完成后，将样品转入纯的甘醇，以便样品中的水能脱出。

显微镜经甘醉置换的组织可用轻乙基丙烯酸醋或9丙基丙烯酸酷包埋，因为甘醉可以与上述树酷直接混溶。如欲用环氧树脂包埋，数码组织则需通过氧化丙烯过渡.

为了避免水溶性成份的移位和流失。显微镜冷冻置换后的样品在切片和染色时均不再接触水。为此，切片刀的槽液应使用甘醉。数码显微镜染色时可用磷钨酸或醋酸铀，两者均可溶于甘醉，因此，实际上采用的是负染法。染色后，显微镜将多余染液用滤纸吸去，把载网放入真空喷镀仪真空罩内，抽低真空(只开机械泵)，使甘醉蒸发后，即可在数码显微镜下观察。